答辩人：徐玉平
学院：植物科学技术学院
时间：-12-:00
答辩地点：分子楼小型会议室
学位论文简介：
核盘菌[Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary]是一种重要的植物病原真菌，可以引起多种经济作物菌核病。生防菌盾壳霉（Coniothyriumminitans）是核盘菌的一种专性重寄生真菌。草酸是核盘菌分泌的重要致病因子，具有酸性、还原性和螯合钙离子等特性，草酸在盾壳霉与核盘菌互作过程中发挥重要作用。但是，盾壳霉响应草酸的分子机制还知之甚少。本文利用转录组分析、基因敲除和回补等技术研究了盾壳霉响应草酸相关基因的功能，旨在解析盾壳霉响应草酸的分子机制。全文鉴定了一个新的草酸脱羧酶基因CmOxdc3的功能，发现其主要在胞内降解草酸；明确了CmCRZ在盾壳霉与核盘菌互作过程中扮演重要角色；明确了盾壳霉中bZIP基因家族及其对草酸的差异性响应，证明CmbZIP16响应氧化胁迫。这些研究结果表明草酸在盾壳霉-核盘菌互作中扮演重要角色，有助于全面揭示盾壳霉-核盘菌之间的分子互作机制。
02miR-B10-3p在牛疱疹病毒5型体外潜伏感染再激活中的作用研究答辩人：刘洁
学院：动物科学技术学院、动物医学院
时间：-12-:00
答辩地点：农业微生物学国家重点实验室B座3楼会议室
学位论文简介：
牛疱疹病毒5型（Bovineherpesvirus5，BoHV-5）是疱疹病毒科α疱疹病毒亚科水痘病毒属的一员，感染犊牛后引起严重神经系统疾病，造成巨大的经济损失。BoHV-5感染首先在口腔或生殖器粘膜产生裂解感染以进行病毒复制；随后沿嗅觉和三叉神经途径逆行到感觉神经元，在此建立以潜伏期相关转录为特征的潜伏期；应激刺激后再激活，产生感染性病毒粒子。α疱疹病毒的两个典型特征：在神经细胞中建立潜伏感染和编码miRNAs。MiRNA体积小，功能灵活且不易产生免疫原性，作为新兴的调控因子，对调节病毒或宿主基因表达等方面具有重要功能。本实验室前期通过高通量测序和NorthernBlot技术验证了BoHV-5感染牛肾细胞（Madin-Darbybovinekidney,MDBK）后，其基因组编码至少11个miRNAs基因，BoHV-5-miR-B1至BoHV-5-miR-B11，这些基因的前体miRNA（pre-miRNA）被加工成17个成熟的miRNAs。然而，在裂解性感染过程中表达的BoHV-5miRNAs对病毒潜伏期的建立和再激活的作用尚待阐明。由于动物模型成本较高且耗时长，目前缺乏能够研究与BoHV-5再激活有关的关键分子的稳健实验模型，病毒miRNAs在潜伏期的表达检测受到阻碍，对病毒在裂解感染和潜伏感染之间转换的潜在分子机制了解甚少。为了研究牛疱疹病毒miRNA在不同感染转换之间发挥的作用，我们进行以下的研究，具体内容如下：（1）建立BoHV-5体外潜伏感染再激活模型首先在体外分离培养了昆明鼠颈上神经节（superiorcervicalganglion，SCG）细胞，验证SCG支持BoHV-5有效感染。在μmACV和IU/mLIFN-α存在下BoHV-5感染SCG能够表现出潜伏期的关键标志，包括潜伏相关基因（Latency-related，LR）积累、可检测的裂解基因表达的缺失和潜伏期病毒基因组的存在，以及神经生长因子（nervegrowthfactor，NGF）去除后感染性病毒粒子的产生。（2）BoHV-5体外感染中miRNA的表达在构建的BoHV-5体外潜伏感染再激活模型基础上，通过茎环引物反转录PCR（stem-loopRT-PCR）检测裂解感染、潜伏感染和再激活三种情况下BoHV-5编码的16种miRNAs的表达时序，并通过荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization，FISH）技术鉴定了miR-10-3p和miR-10-5p的存在。我们的结果表明BoHV-5在裂解感染和潜伏状态microRNAs的差异表达。（3）miRNA-B10-3p在BoHV-5体外感染中的作用研究最终将在裂解感染时读数最高并在潜伏期可检测到的miR-10-3p作为后续研究病毒miRNA在BoHV-5生命周期中作用的代表角色。我们使用细菌人工染色体（Bacterialartificialchromosome，BAC）重组方案将miRNA-B10-3p的靶位点UL39的3UTR产生7个碱基突变。结合实验室前期构建的miRNA-B10-3p致弱毒株，与野生型相比，突变株失去对靶基因调节表现为裂解感染期高拷贝DNA的复制，导致需要提高抗病毒药物使用量才能在体外建立潜伏期，潜伏期基因组表现了比野生型更强的活跃度和高效率的再激活。总之，我们的试验结果表明，BoHV-5潜伏期的研究将从体外神经元培养模型中获益，并证明BoHV-5体外潜伏感染再激活模型有助于研究潜伏期中的miRNAs。miRNA-B10-3p对BoHV-5潜伏和再激活的影响揭示了独立于宿主对病毒基因组的沉默之外，病毒自身miRNA可以作为病毒在不同感染状态之间转换的开关之一。03流感病毒PA拮抗宿主干扰素信号通路机制研究和基于CRISPR/Cas9全基因组筛选禽流感病毒增殖相关宿主基因答辩人：易辰阳
学院：动物科学技术学院、动物医学院
时间：-12-:00
答辩地点：农业微生物学国家重点实验室B座3楼会议室
学位论文简介：
A型流感病毒能够对人、家禽和鸟类等造成急性呼吸道感染，对公共卫生健康和全球经济稳定造成潜在威胁。自以来，H5N1高致病性禽流感病毒在世界各地的流行和传播，对各国的养禽业造成了巨大的损失；年H1N1流感病毒在美国爆发，蔓延到多个国家和地区，造成近20万人的死亡；年H7N9禽流感病毒在我国经历了5次爆发，对我们国家的养禽业造成了巨大的冲击。其中，H5N1高致病性禽流感病毒和H7N9禽流感病毒对从业人员造成感染和死亡的事件也有散在报道，值得引起我们的
